KRAS，这个在人类癌症中突变频率居高不下的致癌基因，曾长期被贴上“不可成药”的标签，困扰全球科研界数十年。直到近年来，KRASG12C共价抑制剂的问世，才终于打破这一僵局。然而，临床实践很快抛出新的难题：尽管这类药物初期疗效显著，耐药性却如影随形，多数患者在用药一年内便会出现疾病进展，陷入“靶向有效却难持久”的困境。
耐药后该怎么办？传统治疗思路多聚焦于开发下一代抑制剂，但KRAS耐药机制复杂多样——可能是KRAS信号通路持续激活，可能是旁路通路异常激活，也可能是KRAS基因扩增。幸运的是，研究人员发现一个关键线索：KRASG12C突变中的半胱氨酸残基本身，很少发生二次突变。这意味着，即便肿瘤产生耐药，G12C突变依然会保留在癌细胞中，理论上仍是可靶向的“靶点”，核心问题在于：如何精准捕捉并利用这个靶点，清除耐药癌细胞？
近期，发表在国际顶级期刊《Nature Communications》上的一项重磅研究，为破解这一困局提供了全新的思路。来自Aethon Therapeutics的研究团队首次通过质谱免疫肽组学技术，直接定量了KRASG12C抑制剂在肿瘤细胞表面“创造”的独特“合成新抗原”，并通过工程化抗体将其牢牢“锁定”，引导人体免疫系统精准清除耐药肿瘤细胞。这一突破不仅为KRAS抑制剂耐药患者提供了强有力的治疗武器，更开创了“合成新抗原”免疫治疗的全新范式，为肿瘤精准治疗开辟了新赛道。
一、 KRASG12C：从突破“不可成药”到陷入耐药困局
KRAS基因就像是细胞生长的“开关”，正常情况下，它能精准调控细胞的增殖与分化。然而，当它发生突变时，这个开关就会被卡在“开启”状态，导致细胞不受控制地疯狂生长，最终癌变。在所有KRAS突变中，G12C突变是其中一种重要的亚型，它在非小细胞肺癌、结直肠癌和胰腺癌等多种恶性肿瘤中均有发生，仅在美国，每年就有数万名新确诊患者携带这一突变。
2021年，全球首款KRASG12C抑制剂Sotorasib的获批，标志着人类终于攻克了KRAS“不可成药”的历史难题。这类药物能精准地插入突变KRAS蛋白的特殊口袋，共价结合并关闭其活性，从而抑制肿瘤生长。但临床数据显示，尽管大部分患者在治疗初期肿瘤显著缩小，约一半的患者在一年内就会对药物产生耐药性。更棘手的是，耐药后的肿瘤细胞往往依然保留着G12C突变，这意味着它们依然是“罪魁祸首”，却对原有的靶向药不再敏感。
如何清除这些耐药的肿瘤细胞？科学家们将目光投向了人体自身的免疫系统。如果能让免疫细胞识别并杀死这些“顽固分子”，或许就能打破耐药困局。
二、 质谱首次直接定量靶向药创造的“人造新抗原”
在此之前，学术界通过间接证据推测KRASG12C抑制剂会形成带修饰的p*MHC新抗原。研究团队通过质谱免疫肽组学技术，搭配稳定同位素标记内标肽，首次直接鉴定了sotorasib、adagrasib、divarasib三种临床常用KRASG12C抑制剂修饰的新抗原。
实验结果明确：sotorasib修饰的soto-p7肽是核心靶抗原，可呈递在HLA-A3超型分子（A03:01、A11:01、A68:01）表面。但这个靶点存在两大致命缺陷：
丰度极低：在人工构建的KRAS/HLA过表达细胞系中，soto-p7的丰度仅约10拷贝/细胞；而在临床相关的内源性肿瘤细胞中，其丰度低于1拷贝/细胞。
稳定性极差：soto-p7在A03:01上的半衰期仅约30分钟，在A*11:01也仅约90分钟，远低于野生型p7肽。也就是说，这个新抗原刚被送到细胞表面，很快就会降解消失，根本来不及被免疫细胞识别。
这一结果既证实了药物修饰合成新抗原的真实存在，也直指后续研发的核心方向：必须提升新抗原的稳定性与表面密度。
图1 质谱鉴定HLA-A3呈递的药物修饰KRASG12C肽段
三、AETX-R114：让不稳定的新抗原“站稳脚跟”，精准杀伤耐药癌细胞
既然抗原不稳定、丰度太低，能不能想办法把它“稳住”？研究团队基于冷冻电镜结构指导，对先导抗体R023进行精准亲和力成熟，聚焦轻链互补决定区（CDR）改造，最终筛选出p*MHC高亲和力抗体R114，并将其与抗CD3效应臂融合，构建出半衰期延长的双特异性T细胞衔接器（TCE）——AETX-R114。
图2 亲和力成熟抗体AETX-R114 的开发与结合特性
实验结果表明，通过抗体介导的稳定作用，成功逆转了抗原的不稳定性：将p*MHC半衰期从30/90分钟，延长至24小时以上，使NCI-H2122内源性肿瘤细胞表面抗原密度从不到1拷贝/细胞提升至14拷贝/细胞，让原本低丰度、稍纵即逝的“人造新抗原”，终于能稳稳“站”在癌细胞表面，成为免疫治疗的可用靶点。
图3 抗体增强Soto‑P7的表面表位密度
进一步的体内外药效实验表明，AETX-R114仅在KRASG12C抑制剂存在时，高效激活CD8+T细胞、促进IFNγ分泌，特异性杀伤耐药癌细胞，且显示出了良好的安全性。
四、AETX-R302：突破HLA限制，覆盖更广人群
为进一步扩大适用人群，研究团队又继续开发了靶向divarasib修饰KRASG12C新抗原的AETX-R302。令人惊喜的是，R302不仅能识别HLA-A3超型，还能识别HLA-A*02:01，理论上可覆盖美国人群中66%的基因型（AETX-R114覆盖39%）。
体外实验显示，AETX-R302对HLA-A02:01、A03:01、A11:01均具有纳摩尔级亲和力，在人工肽段脉冲实验中可介导T细胞跨超型杀伤。但在药物处理的内源性肿瘤细胞中，目前仅观察到对HLA-A11阳性细胞的有效杀伤——因为diva-p7在A02和A03上的稳定性太差，无法达到有效呈递水平，这也是后续优化的核心方向。
冷冻电镜结构解析揭开了跨超型识别的核心机制：R302识别表位同时包含HLA分子、药物半抗原和肽段三部分，不同长度的肽段通过构象偏移，使药物半抗原处于完全相同的空间位置，被R302精准识别。此外R302的CDR-H3 N端采用了罕见的'LY'序列，而非合成抗体文库中常见的'AR'序列。这是其独特结合界面的关键决定因素之一，为跨HLA超型识别提供了重要结构基础。
图4高亲和力、跨HLA超型抗体R302的功能与结构表征
五、临床价值：开创合成新抗原免疫治疗新范式
这项研究的意义远不止针对KRASG12C单一靶点，更开创了“共价抑制剂+合成新抗原+工程化抗体”的全新免疫治疗范式，破解了肿瘤免疫治疗的多个核心痛点：
盘活不可靶向的胞内致癌靶点：KRAS、EGFR、BTK等多数致癌靶点位于细胞内，传统抗体无法触及。而共价抑制剂可将其转化为表面p*MHC新抗原，让胞内靶点变成免疫治疗靶标；
解决低丰度、不稳定抗原难题：高亲和力慢解离抗体可稳定并富集不稳定/低丰度的新抗原，让原本无法成药的靶标变得“可靶向”；
扩大适用人群：跨超型抗体无需对不同HLA亚型进行个体化定制，大幅降低了“现货型”免疫疗法的开发成本；
直击耐药困境：由于KRASG12C耐药细胞依然保留G12C突变，该疗法有望对一线靶向药耐药患者依然有效，有效地填补后线治疗空白。
结语
从KRAS“不可成药”的绝望，到共价抑制剂的突破性问世，再到合成新抗原免疫治疗的全新突破，KRASG12C突变癌症的治疗历程，正是人类与癌症不懈抗争的缩影。本研究用质谱技术精准鉴定新抗原靶点，用工程抗体“锁死”药物修饰新抗原，为解决KRASG12C耐药的临床痛点提供可行方案，更建立了可复制的精准免疫治疗新范式，未来有望为更多患者带来全新的治疗希望。
参考文献
Maso L, Mosure SA, Rodriguez-Aponte SA, et al. Engineered antibodies that stabilize drug-modified KRASG12C neoantigens enable selective and potent cross-HLA immunotherapy. Nat Commun. 2025;16(1):11264. Published 2025 Dec 17. doi:10.1038/s41467-025-66132-w
